许秋问道。
听到这句话,邱伟表情有些落寞。
自从埃米尔偶然间完成一次血清-抗体的结合之后,直到现在,都再也没有一个实验组成功复现。
不管是埃米尔自己,还是莫雷蒂、赖光圳等人,尝试了各种办法,都见不到第二次结合了!
“不过,这段时间倒是也有了一些不同的结果……不知道算不算的上是成果。”邱伟说道。
许秋点头,示意他继续。
邱伟将早已经准备好的一份份实验数据送了过来。
许秋接过,仔细翻看。
在埃米尔唯一一次复现之后,各个组,都根据许秋的要求,开始调整不同的实验手段。
比如elisa法检测抗嗜沫凝聚杆菌igg/igm抗体……
然而最终的结果,od值始终小于0.1,这提示完全没有特异性抗体结合!
此外,westernblot分析中,倒是差点取得了成绩。
莫雷蒂组,在65kda处出现微弱条带!
然而令人遗憾的是,质谱鉴定为细菌hsp60!
这并不是致病性抗体,与嗜沫凝聚杆菌没有半点关系!
“失败的原因,大概率是因为hsp60与人类hsp60同源性高,导致交叉反应……”许秋分析。
因而第三轮改良,许秋又针对免疫荧光染色做出改动,尝试定位活菌!
手法也很简单。
首先,是细菌固定与载片制备。
活嗜沫凝聚杆菌悬液用4%多聚甲醛固定15分钟,随后滴加10微升至聚赖氨酸包被的载玻片,室温干燥……
随后进行封闭与抗体孵育、封闭液,采取3%bsa-pbs封闭30分钟。
一抗,利用患者血清1:50稀释,湿盒内37摄氏度孵育1小时。
二抗则fitc标记抗人igg,避光孵育1小时……
最终,在激发